MDM2

Az MDM2, melyet eredetileg a mouse double minute chromosome gén termékeként azonosítottak, egy nucleáris oncoprotein, amely egyes tumor suppressor proteinek hatását gátolhatja. Az MDM2 például kötődik a p53 tumor suppressor protein savas aktivációs domainjéhez, és a p53-MDM2 complex csökkenti a p53 transzkripciós aktivitását. A p53 szerepet játszik a normál sejtcikluban, aktiválja a G1 fázisban inaktivitást okozó gének átíródását. Az MDM2 expressziója önmaga is a p53 által indukálódik, ezzel a p53 egy önszabályozó mechanizmusa is lehet a normál sejtciklus folyamán. Az MDM2 túlexpressziója azonban a p53-szabályozta növekedés kontroll elveszítéséhez és ennek következtében szabályozatlan sejtproliferációhoz vezet. Az MDM2 a Retinoblastoma tumor suppressor proteinhez (Rb) is kötődik és gátolja annak növekedés szabályozó funkcióját. Az MDM2 direkt módon gyorsíthatja a sejtproliferációt két transcripciós faktorhoz, az E2F1-hez és a DP1-hez kötődéssel, stimulálva ezzel az S-fázist indukáló E2F1/DP1 heterodimer aktivitását. Az MDM2 csökkent molekulatömeggel migrál, ~95 kDa. Az SMP14 klón a humán, egér és patkány MDM2-t ismeri fel, enyhe keresztreakciót mutat a cytokeratin 6, 14 és 16 fehérjékkel egyes kísérleti rendszerekben. Immunprecipitációs felhasználás esetén az SMP14 felismeri az MDM2-t és a p53-MDM2 complexet. MCF7 humán emlőrák sejtek (ATCC HTB-22) és NIH/3T3 egér fibroblast (ATCC CRL-1658) javasolt pozitív kontrollként western blot és immunoprecipitációs felhasználás esetén. A SMP14 jól alkalmazható mind aceton fixált fagyasztott, mind formailban fixált, paraffinba ágyazott metszetek esetén immunhisztokémiai festéshez. A sejtmagi jel mellett citoplazmás jelölődés is megfigyelhető, amely valószínűleg a citokeratinokkal való enyhe keresztreakció eredménye.